Wraz z rozwojem technologii pojawiają się nowe sposoby wykorzystania źródeł światła LED
Uzyskanie obrazu mikroskopowego nie byłoby możliwe bez światła. Wybór odpowiedniego źródła światła jest kluczowy, aby rozróżnić drobne szczegóły próbki. Tradycyjnie w mikroskopii metodą światła przechodzącego i odbitego stosowano lampy halogenowe. W przypadku mikroskopii fluorescencyjnej zwykle używano źródeł światła o dużym natężeniu, takich jak lampy ksenonowe lub rtęciowe. W ostatnich latach jednak tendencja na rynku mikroskopii zmienia się — zamiast lamp halogenowych i rtęciowych stosowane są źródła światła LED, które zapewniają szereg korzyści w zakresie wysokiej intensywności i emisji bliskiej podczerwieni w porównaniu z tradycyjnymi źródłami światła.
Światło LED — nowa norma
Dzięki udoskonaleniu technologii LED w ciągu ostatnich kilku lat na całym świecie odnotowywano tendencję zniżkową na rynku lamp halogenowych. W odróżnieniu od lamp halogenowych, diody LED są w stanie utrzymać stałą temperaturę barw przy zmianie natężenia światła. Zapewnia to stałą kolorystykę próbki zarówno przy obserwacji przez okulary, jak i w przypadku obrazowania za pomocą kamery cyfrowej. Poziom intensywności diod LED jest zbliżony do poziomu intensywności lamp halogenowych, ale zużywają one znacznie mniej energii i mają dłuższą żywotność. Przyjazność dla środowiska to kolejna zaleta diod LED, ponieważ eliminują one konieczność wymiany lub utylizacji żarówek. Ponadto diody LED są bardziej stabilne i generują mniej ciepła niż lampy halogenowe, co w kontekście mikroskopii jest ważne podczas obserwacji próbek wrażliwych na temperaturę. Technologia LED nadal rozwija się wraz ze wzrostem zapotrzebowania na oświetlenie LED, co skutkuje zwiększeniem jasności oświetlenia, zmniejszeniem rozmiarów diod i obniżeniem ogólnych kosztów.
 |
 |
Nowe sposoby wykorzystania technologii LED
Firma Olympus opracowała dwa nowe sposoby oświetlania nieprzejrzystych próbek za pomocą diod LED. Pierwszy z nich to kierunkowe oświetlenie metodą ciemnego pola. W kierunkowym oświetleniu metodą ciemnego pola wykorzystywany jest suwak oświetleniowy, który zawiera 16 diod LED ułożonych w okręgu. Diody LED oświetlają próbkę kierunkowo pod kątem, podobnie jak przy tradycyjnym oświetleniu metodą ciemnego pola, ale zapewniają większą elastyczność dzięki różnym geometriom segmentów, kątom, które można ustawiać krokowo, i poziomom intensywności. Dzięki tej elastyczności użytkownicy mogą uwidocznić wady trudne do zauważenia przy oświetleniu metodą jasnego pola, a także odróżnić uniesione powierzchnie od zagłębień.
Drugą nową opcją oświetlenia jest oświetlenie metodą MIX. Metoda MIX stanowi połączenie kierunkowego oświetlenia metodą ciemnego pola z inną tradycyjną metodą oświetlenia, taką jak obserwacja w jasnym polu, w świetle spolaryzowanym lub w świetle fluorescencyjnym. W celu uwidocznienia wszystkich kluczowych elementów niektórych struktur wymagane jest wysoce precyzyjne skorygowanie kontrastu. Użytkownicy mogą na jednym obrazie porównać to, co zauważyli przy użyciu tradycyjnych metod kontrastowych, z nowymi elementami ujawnionymi przy obserwacji metodą kierunkowego oświetlenia metodą ciemnego pola. Jest to pomocne przy definiowaniu konturów i poprawianiu kontrastu w analizie opartej na wartościach progowych oraz przy wizualizacji dwóch różnych materiałów obecnych w tej samej próbce. Interesujące jest również połączenie kierunkowego oświetlenia metodą ciemnego pola i fluorescencji, ponieważ umożliwia ono jednoczesne obrazowanie zarówno obszarów fluorescencyjnych, jak i niefluorescencyjnych w celu przyspieszenia analizy.
 |
| Obserwacja metodą jasnego pola (po lewej), obserwacja przy kierunkowym oświetleniu metodą ciemnego pola (pośrodku) i obserwacja przy oświetleniu metodą MIX (po prawej). |
